第八百一十八章 複方川貝消喉噴霧（完）(第1/2頁)

“這個實驗其實不不難，一共只分為兩步。”

“首先是聚合酶鏈式反應，即PCR擴增反應；第二步是酶切反應。”

張興運介紹道。

第一步，在PCR擴增反應部分，只需要跟著想要的結果，明確各種試劑和樣品的加入量以及擴增條件，按照正常的要求操作即可。

需要注意的是，吸取試劑時，一定要排盡氣泡，由於試劑的加入量都非常小，滴加試劑時，常常出現試劑聚集在槍頭尖端，形成一個小液滴，難以滴下，可以將液滴打到離心管內壁上。

利用其與離心管內壁的吸附作用力，將液滴留在離心管內。

最後，再用無菌超純水補足3滴反應體系後，將離心管蓋蓋好，至於離一t2機中，離心30秒，以使試劑、樣品和水在離心管底部充分混勻。

更有利於PCR反應的順利進行，可以大大增加擴增反應的成功率。

至於酶切反應。

可以在滴加實驗一得到的結果後，再滴加適量BSA，它是一種酶切反應催化劑，能夠使酶切反應進行更徹底。

酶切效果更好：通常試劑一與BSA的體積比約為1：2。

“我們在在川貝母的PCR鑑別試驗中，Sma I加入量為0。5鬥l，BSA的加入量為1鬥。滴加BSA後，酶切反應的體系仍為20鬥，所以無菌超純水的加入量要相應減少。酶切反應的條件應設定為30，反應2 h。”張興運說道。

陳浩然還是沉默。

但這種沉默已經代表了一種態度。

不贊同，不拒絕。就靜靜的看著，即便你作死也好，即便你成仙也罷，他都這麼靜靜的看著。

當然，實驗室裡面的實驗還在繼續。

“電泳檢測酶切反應完成後所得到的溶液。得到的結果是？”楊光問道。

“含有標準規定的長度在100～250 bp的兩條DNA條帶，需要用瓊脂糖凝膠電泳法進行檢視。”終於回答道。

走到這一步，實驗的還在繼續。

但至少楊光並沒有再提出什麼質疑。

鍾醫和楊光還是按照實驗步驟再進行，首先，需要制膠和配製電泳緩衝液，制膠用緩衝液和電泳緩衝液應保持一致，用百分之1的TAE或TBE即可。

“注意，在制膠過程中注意做好防護，切勿燙傷。”鍾醫提醒道。

“假好心。我會出事？”楊光沒氣的說道。

兩人，待膠溶液溫度下降至60℃左右時，滴加少量GelRed，振搖混勻後緩慢傾倒人插好梳子的膠槽中，他們儘量不產生氣泡，以免影響電泳效果。

待膠凝固並冷卻至室溫後。即可將其轉移至電泳槽中，準備電泳。

下一步，兩人依次將樣品、對照藥材、空白對照加入膠孑L中。

楊光特別小心，手十分穩，沒有戳破膠孑L邊緣或戳穿膠孔底部。以免影電泳效果。

“他們現在再加加樣緩衝液，這樣做主要是兩個作用。”

“一方面其密度較大，可使樣品沉積在膠孔底部，避免樣品上浮外溢，保障電泳條帶密集緊湊，防止擴散。”

“另一方面，其中新增染色劑。可以在電泳過程中指示前沿。電泳結束後。可將凝膠置於凝膠成像儀上進行檢視。”

張興運說道。