正丁醇部位以氯仿一甲醇梯度洗脫,得到流份實驗標誌物1~4,其中實驗標誌物1經反覆矽膠柱層析,得到化合物5(51毫克。

實驗標誌物4上ODS柱,甲醇一水梯度洗脫,再經Sephadex LH20凝膠柱純化,得到化合物2(42毫克、3(57毫克、4(73毫克。

既然我覺得它有用,那麼我們採用抗腫瘤活性實驗法進行實驗。

首先,細胞接種用含百分之10胎牛血清的RPMI1640培養液培養MNK45和SGC一7901,收集對數生長期細胞,消化後調整其懸液濃度,以每孔1×104個細胞接種於96孑L板,每孔200 trL。

細胞培養將細胞板放人CO:孵箱中,在37攝氏度、百分之5CO,條件下培養24 小時,當細胞達到80%~90%匯合度時,棄去培養基。

接下來,就是細胞給藥。

我們將將樣品用DMSO溶解後,按200、100、50、25、12.5克/毫升質量濃度加人細胞孔內,重複3批,並另加3孔作為陽性對照(5氟尿嘧啶組。

3孔作為DMSO對照組,每孔總體積100止,在酶聯免疫檢測儀上測定各孑L吸光度,計算細胞抑制率、

公式為抑制率=(1一加藥細胞吸光度/對照細胞吸光度×100%。再採用Logit法計算IC。

然後是實驗結果。

結構鑑定分別有化合物1:白色無定形粉末(甲醇。

化合物2:白色粉末(氯仿,化合物3:針狀結晶(甲醇。化合物4:黃色粉末(甲醇。化合物5:黃色針晶(甲醇化合物6:黃色粉末(甲醇,化合物7:無色針狀結晶(氯仿,化合物8:白色粉末(甲醇。

我們這裡能夠看出,LC與谷甾醇對照品Rf值及顏色一致,混合熔點不下降,故鑑定該化合物為p一谷甾醇。

TLC與胡蘿蔔苷對照品Rf值及顏色一致,混合熔點不下降,故鑑定該化合物為胡蘿蔔苷。

還有就是抗腫瘤活性。

根據實驗效果顯示,山柰酚對MKN45和SGC7901的抑制作用較強,IC50分別為48.87。

這個結果,遠遠高於陽性對照(5氟尿嘧啶。

而山柰酚4—甲醚、烏骨藤苷H、I活性較強。

所以,我們能夠清楚的得到了結果。

目前,關於烏骨藤提取物抗胃癌活性的報道主要集中在水提物和甾體化合。

而這一次的實驗採用人胃癌細胞SGC7901和MKN45,對該植物中分得的化合物進行體外抗腫瘤活性實驗,發現黃酮類成分山柰酚對兩者均表現出明顯的抑制作用。

我這一次的實驗表明,其能夠透過作用於SGC7901的活性氧代謝途徑來誘發細胞溶血,從而產生抗增殖活性。

當然,這一次尚無對MKN45作用機制進行研究,故需要更深入的探索,以期為開發利用烏骨藤提供科學依據。

這項研究,單憑我一個人肯定是難以完成的,所以,我想要……”

還沒有等鍾醫說完,甚至鍾醫都沒有沒有表達出什麼想法的時候,一個聲音急迫的表示了自己的意願。

“我可以!我真的可以!鍾醫,我可以幫你,不,我可以給你打下手,進行這些實驗標誌物的進一步開發。”

楊光毫不猶豫地表達道。